MNS基因复合物（GYP）位于4号染色体（4q31.21）的长臂上，由三个紧密相连的基因组成：GYPA编码携带M和N抗原的血型糖蛋白A，GYPB编码携带S、s和U抗原的血型糖蛋白B，以及没有MNS抗原特异性的GYPE。文献中报道了GYPA和GPYB中的几十种单核苷酸多态性（SNP），在MNS系统中产生变异抗原。GYPB基因的两个等位基因P2和NY产生S-，s-，Uvar表型。迄今为止分析的所有GYPB(P2)和GYPB(NY)等位基因都携带GYPBS特异性SNP。2013年，Arnaud等人描述了使用BioArray HEA v1.2BeadChiprm试剂盒 (Werfen，意大利米兰)检测到的一种干扰GYPBS等位基因分型的GYPB突变。他们通过该试剂盒对两名患者进行基因分型，发现他们为GYPB(P2)杂合子和GYPBs纯合子，进而在患者的DNA中鉴定出一种新的c.137-8C>T突变，该突变与P2等位基因相关。

我们的扩展血清学分型研究使用Grifols（西班牙巴塞罗那）公司提供的全自动凝胶检测方法（DG Gel），对ABO、C、E、c、eK、kpa、Kpb、Fya、Fyb、Jka、jkb、M、N、S、s、Lua、Lub、Pi、Xga、Lea、Leb表型进行分析。对于基因分型，我们采用了Werfen公司提供的基于微阵列的BioArray HEA v1.2 BeadChip 试剂盒，该试剂盒涉及C、E、c、e、V、VS、K、k、Kpa、Kpb、JsaJsb、Fya、Fyb、Fyb-weak、Fy-null、Jka、kb、M、N、S、s、U-var、U-neg、Lua、Lub、Dia、DibDoa、Dob、Hy、Joa、Coa、Cob、Scl、Sc2、LWa、LWb多种表型的检测。该试剂盒检测的UvarP2和NY等位基因分别由针对c.270+5G>T和c.230C>T的特异性探针检测。

本案例的患者是MS，38岁高加索男性，其红细胞表型为CCDEE kk，由于是RhCE单倍型，我们进一步进行扩展血清分型和基因分型分析。扩展分型的结果显示为Fya+b+，Jka+b+，Kpa-b+，Lea-b+，Lua-b+，M+N+S+s+，Pi+。S抗原呈阳性，但反应性中等（+---）。基于基因分型预测的表型为C-c+，E+e-，K-kt，Kpa-b+，Jsa-b+，Fya+b+，Jka+b+，M+，N+，S（未确定），s，U+，Lua-b+，Dia-b+，Coa+b-，Doa+b-，Hy，Joat，IWa+b-，Sc1+2-。为了更好地定义GYPB*S等位基因，从供体MS提取的基因组DNA样本被送往参考实验室进行双向DNA测序。如图1所示，基因组测序确认了GYP*S和GYPB*s等位基因的存在，从而预测出S+s+表型。然而，还观察到一个杂合的c.137-8C>T点突变。该多态性在数据库中记录为rs183176514，位于HEA BeadChiprm试剂盒探针结合区域，并影响S抗原的检测，导致我们分子分析中反复出现不确定的结果。测序分析和HEA BeadChiprm结果（图1A，橙色箭头）均未显示GYPB(P2)等位基因的特征突变，c.270+5G/T。已知c.137-8C>T GYPB突变会影响BioArray HEA vi.2 BeadChip试剂盒对S抗原（GYPB C.143T）的检测，导致结果的不确定。之前的报告中，这种突变均与GYPB(P2)等位基因特征性的c.270+5G/T多态性相关。据我们所知，这是首次描述这种基因改变与P2等位基因无关的案例。根据我们的血清学数据，当S抗原与其他GYPB多态性无关时，突变会导致S抗原的弱表达。

（B和C）：红色：脱氨酸（A），蓝色：胞嘧啶（C），黄色：鸟嘌呤（G），绿色：胸腺嘧啶（T），绿色和蓝色：嘧啶（Y）。