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血液科普
【献血科普】说说抗体筛查
时间:
2024-12-31
来源:
淄博市中心血站
作者:
淄博市中心血站
抗体筛查的目的是检出具有临床意义的抗体,包括与胎儿新生儿溶血病(hemolytic disease of thefetus and newborn,HDFN)、溶血性输血反应或显著降低输注红细胞存活率相关的抗体。抗体筛查采用间接抗球蛋白试验(indirect antiglobulin test,IAT),在体外证明红细胞和抗体之间存在反应。试验步骤为:将受血者血清或血浆与未混合的抗体筛查试剂细胞一起孵育,可使用含有2~4种筛查细胞的谱细胞,37℃孵育后,洗涤细胞以除去未结合的抗体,加入抗人球蛋白试剂后出现凝集表明存在与特定红细胞抗原相结合的抗体。
抗体筛查阳性时应进行其对相应红细胞抗原鉴定。用于抗体鉴定的补充检测策略包括使用增强介质(白蛋白添加剂、低离子强度盐水、聚乙二醇)和/或对筛选细胞进行酶或化学处理。当前检出或以前曾有具有临床意义的红细胞抗体的患者,应输注相应抗原阴性、交叉配血相容的全血和/或红细胞。
随着时间的延长,患者血浆中具有临床意义的同种抗体可能变成无法检出。1年内有30%~35%,10年后有近50%的抗体降至无法检出水平。弱抗体未被检出的患者随后有可能快速产生回忆性抗体,出现迟发性溶血性输血反应。
抗体筛查及鉴定的注意事项
一、标本要求
在抗体检测的试验中,血浆和血清均可用于抗体检测,除非需要补体。血清可以提供补体,但需要补体的情况少见。使用血清或者血浆由检测方法决定。不同标本的用量根据试验方法的不同存在差异,一般5~10ml全血可满足鉴定简单抗体的相关实验;更复杂的抗体鉴定则需要更多的全血。检测自身红细胞时,为避免体外补体致敏红细胞,应使用DTA抗凝血样而非凝固血样。
二、试剂和检测方法
1.抗体筛选细胞
用于输血前抗体筛选的0型红细胞已商品化,通常由2个或3个单供者红细胞组成。美国FDA批准的商品化抗体筛选试剂红细胞要求必须表达以下抗原:D,C,E,c,e,M,N,S,s,P1,Le,Le,K,k,Fy,Fy,Jk和JK。
2.抗体鉴定谱细胞
可以用含有已知主要血型抗原的红细胞谱(通常为8~14个试剂红细胞)检测血清或血浆,从而鉴定血清中的红细胞抗体。通常,抗体鉴定红细胞可用商品化试剂。除特殊情况外,抗体鉴定细胞是0型,可以鉴定任何ABO血型的血清。
3.检测方法
现在普遍使用的抗体鉴定方法均遵循血凝反应原理(试管法或微柱凝胶法)或红细胞黏附(固相凝集法)。试管法在不同的检测阶段中较为灵活,可使用多种增强介质(从而获得不同程度的灵敏度),需要的设备也比较少。
微柱凝胶法和固相凝集法能够提供稳定结果,减少主观判断,使工作流程标准化,以及可以整合入半自动或自动化系统之中,为大多数血型抗体鉴定提供灵敏的检测平台。微柱凝胶法、固相凝集法及敏感度高的试管法也可以增强血清学反应(如温自身抗体检测),这在临床输血中红细胞成分的选择上可能意义不大。不同的方法其敏感性、灵敏度、自动化能力及成本不同,为实验室进行抗体检测和鉴定提供了多种选择,从而与不同需求的患者群体、规模不等的实验室以及专业水平和经验参差不齐的检验员相适应。
三.注意事项:
1.红细胞标本一定不能被细菌污染,否则出现假阳性反应。尽可能应用当日采集的新鲜血做本试验。如不得不用过夜血或陈旧血,则必须首先用该标本做阴性对照试验,以确定该标本是否可以 做本实验。
2.血清标本:血清标本必须充分去纤维蛋白,否则标本中纤维蛋白在微柱凝胶中析出,阻碍阴性红细胞沉淀,呈假阳性反应。
3.如在微柱凝胶管中出现溶血现象,强烈提示为红细胞抗原抗体阳性反应,也不排除其他原因所致溶血,故对此标本一定认真分析,并向上级主管技术人员报告并讨论其原因。
4.每日试验前,先取出微柱凝胶卡放置至室温。
5.试剂卡应放在18-25℃储存。如若长期放在4℃冰箱,建议每1-2个月取出,用专用离心机离心一次,以防止干胶或产生气泡
。
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