2024年12月9日 星期一

短期冷藏储存血小板的反应性

时间:2024-10-12来源:浙江省血液中心作者:翻译:陈舒 浙江省血液中心 审核专家:姜桂华
摘要
简介:冷藏血小板具有更好的止血反应性,因此在治疗急性出血中具有优势。然而,冷藏保存与输入的血小板在体内短期循环和迅速清除相关。由于临床上绝大多数需要血小板输注的患者为慢性血小板减少症患者,需要血小板在循环中长时间停留,因此室温保存成为血小板的标准储存方式。另外,输血服务机构为不同适应证提供两种不同血小板(冷藏或室温保存)可能存在困难。
前期研究表明冷藏后血小板的反应性增强是由于抑制性信号通路减弱所致,这会促进血小板聚集反应的增强和流动条件下的血小板黏附增加。冷藏诱导的效应在冷藏后1至2小时内启动,其特征是作为血小板抑制的关键标志物血管扩张刺激磷酸蛋白(VASP)的磷酸化水平降低。总之,短期冷藏1至2小时即可使血小板的反应性增强。
由于之前的研究是针对由枸橼酸盐抗凝全血新鲜制备的富血小板血浆进行的,因此本研究将临床使用的室温储存的机采血小板短期暴露于冷藏温度(短期冷藏1小时)下,以此作为在输血前“按需”获得具有更高止血能力的血小板的处理方法。本研究的目的是确认短期冷藏1小时对机采血小板的影响。
方法:血小板按照标准化条件在室温保存1天或2天,然后冷藏1小时,取样进行分析。血小板反应性通过采用阈值浓度的不同激动剂的聚集研究和采用流式细胞术检测纤维蛋白原结合来进行测量。抑制信号研究包括使用流式细胞术或Western blot检测VASP磷酸化以及环核苷酸水平测量。
结果:ADP、胶原或凝血酶受体激活肽-6(TRAP-6)诱导的聚集反应在血小板冷藏1小时后增强,与TRAP-6诱导的纤维蛋白原结合升高有关。储存1天和2天的机采血小板冷藏1小时后用流式细胞术均可检测到VASP磷酸化水平降低,储存2天的机采血小板冷藏1小时后用Western blot技术可检测到VASP磷酸化水平降低。储存1天和2天的机采血小板冷藏1小时后,诱导的cGMP水平均降低,而储存2天的机采血小板冷藏1小时后,cAMP水平降低。
结论:短期冷藏血小板1小时足以诱导抑制信号的减弱,同时可增强储存2天以内的机采血小板的聚集反应性。“按需”冷藏血小板可能是制备反应性增强的血小板以更有效地治疗出血患者的一种合理方法,这需要在后续的研究中进一步评估。